病理实验形态病理取材心脏常见取材部位

1.心脏的结构特点

心脏位于胸腔内,左右两肺之间。向前上面靠近胸骨和肋软骨;后面为食管和胸主动脉;下面紧贴膈肌,上面为进出心脏的上腔静脉、主动脉和肺动脉。心表面有三条沟,冠状沟为心房与心室的表面分界,前、后纵沟为左右心室的表面分界。

心脏是一个中空的器官,其内部分为四个腔。上部两个为心房,由房中隔分为左心房和右心房;下部两个为心室,由室中隔分为左心室和右心室。左右心房之间,左右心室之间互不相通,而心房与心室之间有房室口相通。

2.心脏灌注固定取材的意义

心脏作为推动全身血液循环的重要器官,含有大量的血液,血液在进行取材包埋染色时容易造成一定的干扰,所以对于大小鼠的心脏取材时,都建议进行灌注固定取材。

心脏灌流可以快速的冲洗干净心脏内残留的血液,并在动物死亡前进行固定,这样可以有效避免组织出现自溶现象。

对于后续进行免疫组化和荧光染色时,多聚甲醛固定后的组织能使组织蛋白发生交联,保持蛋白的原位表面结构结构不变,以保证对应的抗体可以准确检测其表达的位置和量。

3.前处理:心脏灌注固定取材的步骤

1、腹腔注射麻醉小鼠,腹部朝上固定在操作台上。2、打开胸腔,充分暴露心脏,用止血钳固定胸廓。

3、使用止血钳夹住胸主动脉,使其完全闭合。

4、使用手术剪剪开右心耳。

5、用注射针头从左心室穿刺,针头停留在左心室内,轻推注射器确认液体未漏出,然后用止血钳将心壁和针头一并夹持住,防止针头位置移动,缓慢注入生理盐水进行灌注。

6、小心取下盐水注射器,换吸有15毫升固定液的注射器(倒立轻弹注射器以排除接口部位的气泡),继续推注固定液。7、待小鼠停止抽搐后,灌注速度减半,直到灌注完成(灌注完成标志:老鼠前肢剧烈抽动)。8、撤去灌注器械,转移小鼠尸体到洁净托盘中,手术依次分离目标器官进些切割。9、取出心脏后,放入装有多聚甲醛固定液的15毫升离心管内,轻轻晃动组织,防止贴壁。

10、及时写上对应标签并封口。

11、常温固定,及时安排相关实验。

4.心脏常见取材部位

1.纵切最大面:同时观察左右心房和左右心室,即四腔心。

2.横切心脏梗死区与正常区域交界处:观察心梗处损伤;

3.横切心尖,心底,横切左右心房,横切左右心室

注意:①横切心尖用于观察心尖实体心肌,此处心肌纤维排列较为紧密;

②横切左右心室用于观察左右心室腔面,一般取心脏中间1/2处横切即可,属于最常见切面;

③横切左右心房用于观察左右心房腔面;

④横切心底用于观察冠脉部位和主动脉瓣以及主动脉窦,主动脉根部主血管;

5.心脏常见特殊染色以及常做免疫荧光指标

6.心脏常见切面图以及常见指标图片鉴赏

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